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酵素結合免疫吸着測定法(ELISA)サービス
酵素免疫測定法(ELISA)は、昔から現在まで、分析物検出のための主要な方法です。 医薬品開発研究において、高品質で信頼性の高いELISAデータは、科学研究には不可欠です。
弊社の研究者チームは長年の経験に基づき、種類が豊富なタンパク質を自社で製造しています。また、抗イディオタイプ抗体やすぐに使用できるELISAキットも提供可能です。
弊社ACROBiosystems では、SpectraMax i3x システム (Molecular Devices) を使用して、高品質の吸光、蛍光、ルミネセンスの測定を提供しています。また、ScanLaterTM Western Blot 拡張と Alpha Screen 384 STD 検出カートリッジを取得し、顧客に多様な分析法を提供しています。
Sensitivity across spectrum with Spectral Fusion™ Illumination
Expanded dynamic range with cooled PMT
Cartridges for FP, AlphaScreen and Western Imaging
SpectraMax i3xシステムに基づいて、弊社は、抗体と抗原の相互作用の定量化と検出のためのバイオメディカル研究開発サービスを提供します。 抗薬物活性(ADA)、PK / PDアッセイ、抗体スクリーニングなどは提供可能なサービスです。
分析レポートは、サンプルを受け取ってからの2週間以内にお届けします。
競合ELISA法などを用いて、ペプチドスクリーニングや抗体スクリーニングなどのスクリーニングサービスを提供しています。
例として、弊社が独自開発のAnti-SARS-CoV-2中和抗体力価血清学的キット(製品番号:RAS-N022)を使用して、ペプチドサンプルのスクリーニングアッセイを行うことができます。
キットのマイクロプレートは Human ACE2 タンパク質がプレコートされています。血清サンプル、Positive control、Negative control を添加し、次に HRP-SARS-CoV-2 Spike RBD を添加します。検体中の中和抗体は ACE2 と競合し、HRP-SARS-CoV-2 Spike RBD の結合を阻害します。中和抗体の存在に比例して、シグナル強度は減少します。
図1 ペプチド9スクリーニング(SpectraMax i3x)用の抗SARS-CoV-2中和抗体濃度(μg/ mL)のポジティブリファレンス
図2 抗SARS-CoV-2中和抗体力価血清学的キット(製品番号:RAS-N022)(SpectraMax i3x)を使用したペプチド9(uM)のサンプルスクリーニング。
図3 異なる抗BCMA抗体は、BCMAとBAFFに対して異なる中和能力を持っています。
抗原親和性スクリーニングに加えて、Fc受容体とC1qに対する抗体の親和性は、それぞれADCC/ADCPとCDC効果による細胞殺傷に関与しているため、抗体医薬品候補の開発段階においてFc受容体とC1qとの関連性を試験する必要があります。このように、抗体医薬品候補の開発段階では、Fc受容体やC1qとの関連性を調べることが必要です。
図4 クライアントマウス血漿サンプル中のC3a濃度を測定するためのマウス補体C3aの標準曲線(SpectraMax i3X)。
弊社が製造しているHuman TROP-2 / TACSTD2 Protein, His Tag (製品番号: TR2-H5223) を用いて、顧客が提供した抗体との結合アッセイを行い、提供した抗体の有効性を検証することが可能です。マイクロプレートをTROP-2で一晩コーティングします。サンプル抗体をウェルに添加してから、HRP結合ヤギ抗マウスIgGを添加します。一次抗体が TROP-2 に結合した後、HRP 二次抗体が一次抗体に結合し、TMB の添加によりシグナル強度が一次抗体の濃度に比例します。
図5 抗TROP-2抗体の濃度(nM)とEC50を決定するための光学密度を比較した結合曲線(SpectraMax i3x)。
イディオドープとは、抗体の可変部位の抗原決定基(エピトープ)のユニークな集合のことです。抗イディオタイプ(Anti-ID)抗体は、別の抗体(通常は抗体医薬品)のイディオドープに結合するため、抗体医薬品開発、特に免疫原性やPK/PD解析のためのツールとして使用されています。
前臨床/臨床免疫原性及びPK解析をサポートするために、弊社ACROBiosystemsは様々な高アビリティー抗イディオタイプ抗体とADA/PKサービスを開発しました。
図6 1 µg/mlの固定化Adali**mab、抗Adali ** mab抗体(製品番号ADB-Y19、10%ヒト血清)の濃度を上げて添加し、次に5 µg/mlのビオチン化Adali**mabを添加します。 検出は、HRPコンジュゲートを使用して実行されました。
弊社は、ビーズベースのELISAで使用できる共役磁性ビーズを開発しました。
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