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> 人工多能性幹細胞培養のための成長因子
Cancers 2022, 14, 2266
iPSC-T細胞
iPSC由来T細胞を作製する古典的なアプローチは、以下の手順から始まります:
1. 健康なドナー由来のiPSCをマウス骨髄間質細胞株（C3H10T1/2またはOP9）と共培養し、CD34+造血前駆細胞を作製します。
2. 造血前駆細胞を濃縮し、DLL-1/DLL-4を過剰発現するOP9細胞株と共培養し、さらにサイトカインを追加してT細胞の分化を促進させます。
iPSC-NK 細胞
iPSC 由来の NK 細胞を生成するには:
1. 健康なドナー由来の iPSC をマウス骨髄間質細胞株 M210-B4 と約 20 日間共培養して、CD34 + 造血前駆細胞の生成を可能にします。
2. 次に、CD34 + 造血前駆細胞を濃縮し、規定のサイトカインを含むマウス AFT024 (胎児肝臓由来間質細胞株) または EL08-1D2 間質細胞の単層と 4 ～ 5 週間共培養し、最終的に成熟 NK 細胞を生成します。
iPSC-マクロファージ
iPSC由来マクロファージMφの形成には、より複雑な方法論が必要です：
1. エンブリオイドボディ（EB）形成は、ロータリー懸濁培養、マイクロウェルアプローチ、マイクロ流体ハンギングドロップチップなどの特定の改良を利用して、iPSC由来のMφを分化させる最も一般的な方法です。
2. iPSC由来EBs形成後、GM-CSF、M-CSF、IL-3、IL-4などのサイトカインを補充することにより、骨髄系Mφをさらに誘導することができます。
無菌状態
動物由来フリー
高純度≧95
セルベースアッセイで確認された高い生理活性
ActiveMax®、Premium、GMPの各Gradeを用意
低エンドトキシン ≦0.1 EU/μg
Carrier フリー
天然状態に近いコンフォメーションと修飾
ロット間の一貫性
サイトカインは、細胞および遺伝子治療 (CGT) 薬の細胞培養に使用される重要な原材料です。 通常、前臨床段階では、原材料の安全性と品質の両方を優先することは困難です。 この場合、研究専用製品を使用することができます。 ただし、CMC や臨床段階などの医薬品開発の後期段階に進むと、規制ガイドラインに準拠するために原材料を GMP Gradeの源材料に置き換える必要があります。 この過渡期には、新しい原材料の再評価と検証に多大なエネルギーが費やされています。
前臨床開発から臨床段階へのこの移行を容易にするために、GMP 製品に必要な書類とともに、生物活性がほぼ同一であると評価されたいくつかのGradeのサイトカインを提供しています。 CMCまたは臨床段階に入る際にGMP Gradeの原材料にシームレスに移行し、実行される再評価および検証研究の数を最小限に抑えるために、開発の初期段階でPremium Grade の原材料を使用することをお勧めします。
GMP Human IL-15 Protein on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human IL-2, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human VEGF165, premium grade (Cat. No. VE5-H4210) stimulates proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The ED50 for this effect is 4.216-9.281 ng/mL.
Human IL-2, premium grade (Cat. No. IL2-H5215) stimulates proliferation of CTLL-2 cells. The EC50 for this effect is 1.996 ng/mL, corresponding to a specific activity of 5 ⅹ10^6 IU/mg, which is calibrated against Interleukin-2 (Human, rDNA derived) (2nd International Standard) (NIBSC code: 86/500).
Immobilized Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade (Cat. No. DL4-H5259) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Human DLL4 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 1-16 ng/mL.
Laminin 521 (LA5-H5261) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
Laminin 511 (LA8-H5283) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
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