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抗イディオタイプ抗体

バックグラウンド

抗イディオタイプ抗体は、別の抗体の可変領域を認識し、特異的な結合を生成する抗体です。 抗イディオタイプ抗体は、薬剤開発に広く使用されています。免疫原性分析の重要な基準として使用でき、またinvivoでの抗体薬剤レベルを特異的に検出することもできるため、薬物動態研究における重要な試薬です。

前臨床/臨床免疫原性とPK解析をサポートするために、ACROBiosystemsは、様々な高親和性、高特異性の抗イディオタイプ抗体を開発しました。さらに、創薬プロセスを加速できるように、抗イディオタイプ抗体を使用する試験に適用のプロトコルも提供しております。弊社のパイプラインには、adalim*mab, Ritux*mab, Cetux*mab, Trastuz*mab, and Bevaciz*mab などのターゲットも含まれています。

製品リスト
MoleculeCat. No.AntigenNeutralizing ActivityApplication
Adalimu*abADB-Y19Anti-Adalimu*ab Antibodies (AY19)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Adalimu*abADB-Y23bAnti-Adalimu*ab Antibodies (AY23b) (recommended for PK/PD)Non-Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y10Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY10) (MALS verified, recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y12Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY12) (recommended for neutralizing assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y9Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY9) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-BY13Biotinylated Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY13) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y27Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY27) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y31Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (Non-Neutralizing)Non-Neutralizing AntibodyADA assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y29Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY29) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y28Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY28)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-BY31Biotinylated Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (recommended for PK/PD)Non-Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y36Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY36) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y37Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY37) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA;Neutralizing assay;Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-FY35cFITC-Labeled Anti-Rituxi*ab Antibodies, Mouse IgG1Neutralizing AntibodyADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y35cAnti-Rituxi*ab Antibodies (MALS verified)Non-Neutralizing AntibodyADA assay; Indirect ELISA
Trastuzu*abTRB-Y5bAnti-Trastuzu*ab Antibodies (AY5b) (recommended for PK/PD)Non-Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA
Trastuzu*abTRB-Y1bAnti-Trastuzu*ab Antibodies (AY1b) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
使用例
ADAアッセイ-キャリブレーターに最適

ほとんど全ての生物学的製品は特定の抗薬物抗体(ADA)を誘発します。ADAの出現によって、薬物の有効性が低下、または副作用を引き起こされる可能性があります。そのため、分子の免疫原性を評価し、実験結果を臨床応用に関連付けるには、前臨床研究と臨床研究において、ADA応答を効果的に評価できる実験法が必要となります。

キャリブレーション標準としてのADAがないため、ADAの測定は通常非定量的実験です。また、ADA測定用のポジティブコントロールとして、モノクローナル/マルチクローナル抗体を開発することは、非常に時間がかかります。この問題を解決するために、ACROBiosystemsは、ADAアッセイ用に、標準化された抗薬物抗体をたくさん開発しました。

ケース1- Anti-Rituximab Antibodies ( RIB-Y36)

Anti-Ritux*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized Ritux*mab at 1 µg/ml, added increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 10% human serum) and then added biotinylated Ritux*mab at 2 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 9.7 ng/mL.

Anti-Ritux*mab Antibodies bridging MSD for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Added the mix solution (biotinylated Ritux*mab at 5 µg/mL, SULFO-Ritux*mab at 5Nµg/mL and increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 100% human serum). Detection was performed using MSD Assay with a sensitivity of 0.97 ng/mL.

ケース2- Anti-Adalimumab Antibodies (ADB-Y19)

Anti-Adalim*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized adalim*mab at 1 µg/ml, add increasing concentrations of Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19, 10% human serum) and then add biotinylated adalim*mab at 5 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 0.6 ng/mL.

Measured by its neutralizing ability in a functional ELISA. Immobilized adalim*mab at 0.5 μg/mL (100 μL/well) can bind pre-mixed Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19) and Biotinylated Human TNF-alpha (Cat. No. TNA-H82E3) with an inhibition rate of 100%.

PKアッセイ-invivoでの抗体薬物の定量的解析

ELISAは、抗体薬剤の血漿濃度の検出に使用される方法です。さらに、間接ELISAは、操作が簡単で最も使われており、感度が高いという利点もあります。しかし、二次抗体は通常抗ヒトIgGであるため、非特異的バックグラウンドが高く、マトリックスの干渉を避けるためにマトリックスを1000倍以上に希釈する必要があります。それを解決するために、抗イディオタイプ抗体を使用して、マトリックス内の抗体薬物を測定します。bridging ELISAを使用し、抗イディオタイプ抗体ペアで抗体薬物を測定することによって、非特異的バックグラウンドを大幅に減らすことができます。ACROBiosystemsは、bridging ELISAに使用される抗イディオタイプ抗体を開発しました。

Comparison between anti-idiotypic capture ELISA and anti-idiotypic bridging ELISA for Ritux*mab detection in patient samples. Left: anti-idiotypic capture ELISA; Right: anti-idiotypic bridging ELISA.

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Detection of Ritux*mab by bridging ELISA in serum. Immobilized Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y37) at 2 μg/ml, added increasing concentrations of Ritux*mab (10% human serum) and then added biotinylated Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-BY35) at 1 μg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 1 ng/ml.

製品の特長
高親和性
親和性は、抗原と抗体の間の結合強度を表し、KD値で表され、KD値が小さいほど、抗体の親和性が強くなります。 SPRを使用して、全ての抗イディオタイプ抗体の親和性を測定しました。このメトリックは、アッセイ開発における感度の予測に役立ちます。

Anti-Adalim*mab Antibodies (mouse IgG1, Cat. No. ADB-Y19) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface, can bind human adalim*mab with an affinity constant of 1.36 pM.

高い特異性
抗体医薬品、抗体医薬品ターゲット、異なるIgGサブタイプ、同じサブタイプの他の抗体医薬品も含め、全ての製品に特異性検査を行なっております。抗体医薬品のみに結合し、他のタンパク質や抗体には結合しない製品が合格となります。
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Demonstration of the specificity of Anti-Cetux*mab Antibodies (Cat. No. CEB-Y28) to the Cetux*mab.

高い安定性
製品の安定性を確保するために、ACROBiosystemsは加速実験と凍結融解実験を行い、製品の安定性を検証します。実験において、品質と生物活性が安定していることが確認された製品のみ合格となります。

Reconstituted Anti-Trastuz*mab Antibodies were diluted to 0.4 mg/ml, aliquoted and placed at 37°C. Aliquots were removed from 37°C at every time point and placed at 4°C along with the control. No significant loss of activity was observed.

Anti-Trastuz*mab Antibodies were subjected to the indicated number of freeze-thaw cycles (FT). No significant loss of activity was observed.

薬物動態について

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