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抗体特性解析用酵素

抗体特性解析用酵素
背景
バイオ医薬品として使用される治療用抗体は、分子構造が複雑であるため、製造時に厳しい監視と管理が必要です。生物学的医薬品としての性質により、安全性や製品のばらつきは懸念されます。このように、製品の品質を分析し、特徴付けるためには、包括的で精密なワークフローを導入する必要があります。モノクローナル抗体製品は、mAb、Fc融合、Fab、抗体薬物複合体、二重特異性mAb(bsAbs)、二重特異性T細胞エンゲージャー(BiTE)など、承認が年々増えており、それぞれの翻訳後修飾(PTM)を理解することができれば、製造した抗体のin vivo有効性や薬物動態、作用機構についてより良い洞察と予測も可能となります。
Absの特性解析は、トップダウン解析(全体構造)、ボトムアップ解析(ペプチドシークエンス)、そしてミドルレベル解析(Fc、Fv、PTM)など、いくつかの方法から行われるのが一般的です。抗体の特性評価法を可能にするため、ACROBiosystemsは複数の酵素を開発し、抗体とそのPTMの特性評価を支援しています。
製品一覧
製品情報製品番号所要量
Endo H (500U/μl)ENH-S5116One unit is defined as the amount of enzyme required to remove >95% of the carbohydrate from 10µg of denatured RNase B in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 10µl.
Endo S (200U/μl)ENS-S5143One unit deglycosylates ≥ 95% of 1 μg human IgG, when incubated in 10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH7.4 at 37°C for 30 min.
SpeB (40U/μl)SPB-S5115One unit digests ≥ 95% of 1 µg human IgG1 when incubated in PBS ith 5 mM DTT or TCEP, pH 7.4 at 37°C for 1 hour.
IdeS (20U/μl)IDS-S5143One unit digests ≥ 95% of 1 μg human IgG when incubated in 10 mM sodium phosphate, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH7.4 at 7°C for 30min.
糖鎖分析用ツール
N-結合型糖鎖の構造や種類は、モノクローナル抗体(mAb)やFc融合タンパク質などの治療用タンパク質の免疫原性、薬物動態、薬力学に影響を与えることがあります。
Endo HやEndo Sなどの酵素は、N-結合型糖鎖の種類に応じた切断を行い、その後の解析を可能にします。

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

使用例:

Endo Hはアスパラギン結合(N結合)のハイブリッドまたは高マンノースオリゴ糖を切断するが、複合オリゴ糖は切断しない。
高マンノースまたはハイブリッド型N型糖鎖の切断

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

特長:

特異的に機能する: 複合糖鎖は切断しない
SDS-PAGEで測定した純度≧95%
最適なpH値:5-6
反応時間:1時間

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

使用例:

Endo Sは複雑なオリゴ糖を優先的に切断し、アスパラギン結合(N-結合)したハイブリッドオリゴ糖や高マンノースオリゴ糖の切断は回避する。
複合型糖鎖を切断する。高マンノース型およびハイブリッド型糖鎖に対する活性は制限されている。

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

特長:

高効率IgG特異的エンドグリコシダーゼ
SDS-PAGEで測定した純度≧95%
反応時間:30分間
抗体サブユニットの断片化

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

使用例:

SpeB酵素はIgGを消化してFabとFcの断片を生成する。精製された均質なFab断片は、下記のような用途に使用することができます:
Fab断片の抗原への一価結合に関する研究
Fcを介したエフェクター機能の排除
Fc相互作用による非特異的結合を低減する
 

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

特長:

切断部位 (ヒト IgG1): KTHT / CPPCPAP (ヒンジの上流)
反応時間:60分間

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

使用例:

IdeS プロテアーゼは、ヒンジ領域下流に位置する IgG を F(ab')2 および Fc フラグメントに特異的に切断します。

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

特長:

切断部位 (ヒト IgG1): CPAPELLG / GPSVF (ヒンジの下流)
反応時間:30分間
 
ACRO Quality

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