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> AGLink®部位特異的結合キット
抗体医薬品を開発する際、適切な結合方法はAntibody-Drug Ratio (DAR) を結果により得られる製品の均一性を決定する上で極めて重要な役割を果たし、製品の有効性、忍容性、安定性に直接影響します。
結合方法は、一般的にランダムまたは部位特異的に分類されます。部位特異的結合は、均一性が高く安全性プロファイルが強化された結合薬を生み出す能力があるため、優位な結合方法として選ばれています。
ほとんどすべてのモノクローナル抗体は、Fc ドメインの Asn-297 (またはその周辺) でグリコシル化されています。 グリカンを介した結合は、十分に確立された部位特異的な方法で、抗体の N297 グリコシル化部位を利用して結合します。
この部位での結合は抗原結合領域から離れているため、抗体の結合機能が維持され、結合後の抗原結合能力が損なわれるリスクが最小限に抑えられます。この方法により、抗体のエンジニアリング変更が不要になり、利便性と汎用性が向上し、初期段階の研究効率が大幅に向上します。
Glyco-Therapy Biotechnology Co., Ltd.社とのコラボレーションにより、当社はAGLink® DAR2＆4部位特異的結合キットを開発しました。Glyco-therapyのYTConju™結合プラットフォームに基づいて、このキットは毒素（MMAE）、反応性官能基（Tz / DBCO）、検出ラベル（ビオチン）など、さまざまなペイロードの効率的な結合を促進します。全ての製品は結合薬物の分野における初期段階の研究と生物学的実験を強化するように設計されています。
ワンポット、ワンステップ
DAR 2 または DAR 4 は一つのキットで対応できる
一晩〜 24 時間で均一な DAR 値を達成
クリックケミストリー対応
結合後は均質で安定している
結合キットの種類は包括的
For DAR4 Conjugation
For DAR2 Conjugation
毒素
反応性官能基
検出ラベル
Conjugation with MMAE for antibody screening, preparation, and performance studies in the ADC field.
HIC-HPLC analysis of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
The analysis of the antigen-binding capacity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2), the results showing that binding to the HER2 antigen unaffected by the AGLink conjugation
Less than 5% of antibody aggregation by SEC-HPLC
MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2) are stable in human plasma in vitro
Validated in-vitro cell-killing activity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
DBCO: DBCO はクリックケミストリーで N3 含有分子と反応し、修飾された分子の親水性を高めます。
Tetrazine: BCN または TCO 官能基と反応するテトラジンは優れた反応性を示し、複雑な分子の結合に適しています。
クリックケミストリー反応を利用することで、毒素、蛍光染料、オリゴヌクレオチド、ナノボディなど、さまざまな部分の結合が可能になります。
検出または診断のための抗体のスクリーニングと調製
従来の化学ラベルに比べて、より均質な製品とロット間の一貫性が向上になります。
| Molecule | Cat. No. | Product Description | Preorder/Order |
|---|---|---|---|
| MMAE | ADC-P005 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 1mg) | |
| Tetrazine | ADC-P006 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 1mg) | |
| DBCO | ADC-P007 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 1mg) | |
| Biotin | ADC-P008 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 1mg) | |
| MMAE | ADC-P009 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 5mg) | |
| Tetrazine | ADC-P010 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 5mg) | |
| DBCO | ADC-P011 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 5mg) | |
| Biotin | ADC-P012 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 5mg) |
1.反応に必要な最小用量は？
最小要件は 200 μg で、予想される回収率は 85%超えます。これに合わせて、提供されたプロトコルに従って反応試薬を比例でスケールダウンしてください。
2. プロトコルに従って抗体を濃縮させる必要がありますか?
最適な反応効率を得るには、プロトコルで推奨されている濃度まで抗体を濃縮することをお勧めします。濃縮が不可能な場合は、抗体濃度が 1 mg/ml 以上になるようにし、結合効率を維持するために反応時間を 48 時間に延長してください。
3. この結合キットは、あらゆる種の抗体に適していますか?
この結合キットは、ヒト化抗体の結合に非常に効果的です。ただし、マウスおよびウサギの抗体は構造が複雑で検証が不完全なため、結合効率を高めるために結合時間を最大 48 時間延長する必要がある場合があります。
4. AGLink® ADC 結合キットのリンカーは加水分解できますか?どのような方法で加水分解させますか?
AGLink® ADC 結合キット (MMAE、DAR 2 または 4、1 mg および 5 mg) のリンカーは vc-PAB であり、カテプシン B によって切断できます。他のキットのリンカーの切断可能性は、クリックケミストリー結合中に切断可能なリンカーが使用されるかどうかによって異なります。
5. 結合キットの結合効率はどのくらいですか。また、結合製品の薬物抗体比 (DAR) を検出するためにどのような方法が使用されますか。
これらのキットの結合効率は 90% を超えることがあり、DAR 値は HIC-HPLC (MMAE) または LC-MS (MMAE/DBCO/テトラジン/ビオチン) を使用して分析できます。
6. 結合した製品をどのように保管し、その条件下でその安定性を保つのですか?
結合した製品は PBS バッファーで保管することをお勧めします。このバッファーでは -80°C で 6 か月以上保存できます。凍結融解を何回も繰り返すことは避けてください。
7. このキットにはどのような環境が必要ですか?
AGLink® 結合キットは通常の実験室環境で使用できます。MMAE を取り扱う際は、必ず個人用保護具 (実験着、安全メガネ、耐薬品性ニトリル手袋) を使用してください。
8 この製品には特許制限がありますか? また、CMC の開発と商業生産に影響しますか?
当社の AGLink® 結合キットの知的財産は、Glyco-therapy Biotechnology Co., Ltd. が所有または管理する特許によって一部または全部が保護されています。詳細については、inquiry@acrobiosystems.com までお問い合わせください。
9. Fc N297部位が変異している場合でも、部位特異的結合は実行できますか?
現在の結合キットは、グリコシル化部位での部位特異的修飾用に設計されているため、N297 Fcグリコシル化部位が除去されている場合、このキットは使用できません。ただし、代替方法を使用して部位特異的結合を実現できます。
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