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PD-1経路組換えタンパク質
免疫チェックポイント経路は、がん研究の焦点になっています。PD-L1は、チェックポイントタンパク質の中で最も代表的です。PD-1とリガンドPD-L1/PD-L2の結合によって、T細胞の活性化が抑制され、癌細胞が体の免疫監視から逃れります。このように、PD-1経路を中和することで、免疫系を活性化にできます。
近年、抗PD-1薬がたくさん開発されており、最近の臨床試験において大きなポテンシャルを示しています。 黒色腫、腎細胞癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、または血液癌の患者の治療に役に立っています。
弊社ACROBiosystemsは、PD-1関連製品を提供しております。
ELISAは、タンパク質間相互作用を特徴づけるために使用されるアッセイ技術です。 化合物ライブラリの初期ハイスループットスクリーニング(HTS)でよく使用されます。 ACROBiosystemsは、様々なプレビオチン化PD-1経路タンパク質を開発しております。 ビオチン化タンパク質は、ELISAアッセイでの捕捉と検出の双方向の抗体として利用できます。さらに、通常の抗体より高い特異性と検出感度を示しています。
説明 | 製品番号 | 種別 | 構造 | |
---|---|---|---|---|
Pair 1 | Human PD-L1 / B7-H1 Protein, Fc Tag, low endotoxin | PD1-H5258 | ![]() | |
Pair 2 | Mouse PD-L1 / B7-H1 Protein, Fc Tag | PD1-M5251 | ![]() | |
Biotinylated Mouse PD-1 / PDCD1, Fc Tag, Avi Tag (AviTagTM) | PD1-M82F4 | ![]() | ||
Pair 3 | Human PD-1 / PDCD1 Protein, Fc Tag (HPLC-verified), low endotoxin | PD1-H5257 | ![]() | |
Biotinylated Human PD-L1 / B7-H1, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (AviTagTM) | PD1-H82F3 | ![]() | ||
Pair 4 | Mouse PD-1 / PDCD1 Protein, Fc Tag | PD1-M5259 | ![]() | |
Biotinylated Mouse PD-L1 / B7-H1, Fc Tag, Avi Tag (AviTagTM) | PD1-M82F5 | ![]() |
研究をサポートするために、弊社はPD-1 [ビオチン]:PD-L1阻害剤スクリーニングキット(製品番号EP-101)を開発しました。このアッセイでは、固定化したヒトPD-L1と自社開発のビオチン化PD-1タンパク質との結合を測定する、比色ELISAプラットフォームを使用しています。本製品は、PD-1とPD-L1阻害剤の迅速かつハイスループットなスクリーニングに適しています。
分子名 | 製品番号 | 説明 | 種別 | 規格 |
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PD-1 & PD-L1 | EP-101 | PD-1[Biotin]: PD-L1 Inhibitor Screening Pair | 96 tests, 480 tests |
図2 2μg/mL(100μL/ウェル)の固定化PD-L1は、ストレプトアビジン-HRPで検出した場合、0.038〜0.6μg/mLの線形範囲でビオチン化ヒトPD-1に結合できます。
ビオチン化タンパク質をフルオロフォアタグ付きSAと一緒に使用して、特定の表面マーカーを発現する細胞を検出/分離することができます。 「ANTI-PD-1抗体とその使用方法」という米国特許(米国特許20160159905)で、著者(ファイザー社)はACROBiosystemsのビオチン化PD-L1(製品番号PD1-H82F3)とビオチン化PD-L2(製品番号PD2-H82F6)を使用し、PD-1発現細胞に対する結合アッセイで候補抗体と競合します。 このアッセイによって、抗体の結合活性が測定されます。
バイオパニングは抗体開発のアプローチとして注目されています。 AviTagTMビオチン化タンパク質はSAコーティングされた磁気ビーズ/表面でバイオパニングに使用できます。 コーティング密度が高く、抗原提示が均一であるため、ビオチン化されていないタンパク質や化学的にビオチン化されたタンパク質より優れていると考えられています。
Fcタグで、偽陽性になる可能性があるため、これらの実験には利用できません。 私たちは、Hisタグのみを使用するAviTagTMPD-1経路タンパク質を開発しました。 バイオパニング用にも特に適しています。
分子名 | 製品番号 | 種別 | 構造 | 純度 | 特長 |
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PD-1 | PD1-H82E4 | ![]() | |||
PD-L1 | PD1-H82E5 | ![]() | |||
PD-L2 | PD2-H82E8 | ![]() |
プロの製薬会社サプライヤーとして、弊社は標的タンパク質の活性を検証するためのセルベースアッセイプラットフォームを築き、薬物スクリーニングのために、セルベース試験のデータサポートを提供しております。
弊社では、自社で製造したヒトPD-1過剰発現293細胞を用いたフローサイトメトリーアッセイとセルベースELISAを行い、PD-L1(製品番号 PD1-H5258)とPD-L2(製品番号 PD2-H5251)がPD-1に結合することを確認しました。
図4 フローサイトメトリーアッセイで、組換えヒトPD-L1(製品番号PD1-H5258)がヒトPD-1を過剰発現している293細胞に結合できることが確認されました。PD-L1の濃度は10ug/mLです。
Fig. 5 Immobilized cell surface PD-1 (5x104 of cells per well) can bind Human PD-L2 Protein, Fc Tag (Cat. No. PD2-H5251) with an EC50 of 0.018 μg/mL (Routinely tested).
図6 FACS分析によって、中和抗hPD-L1抗体の濃度を上げることにより、PD-1を過剰発現している293細胞へのPD-L1(製品番号PD1-H5258)の結合が阻害されたことが確認されました。 PD-L1の濃度は10μg/mL、 IC50は12.92μg/mLです。
1. Hydrogel dual delivered celecoxib and anti-PD-1 synergistically improve antitumor immunity
Authors: Li Y, et al.
Journal: Oncoimmunology
Application: ELISA
Product: PD1-M5228
2. Hererocyclic compounds as immunomodulators
Authors: L Wu, et al.
Journal: US20170107216A1
Application: HTRF Binding Assay
Product: PD1-H5229
3. Hererocyclic compounds as immunomodulators
Authors: J Li, et al.
Journal: US20170145025A1
Application: HTRF Binding Assay
Product: PD1-H5229
4. A novel PD-L1-targeting antagonistic DNA aptamer with antitumor effects.
Authors: Lai WY, et al.
Journal: Mol Ther Nucleic Acids
Application: ELISA-based competition assay
Product: PD1-H5229
5.Anti-pd-1 antibodies and methods of use thereof
Authors: Yasmina Noubia Abdiche, et al.
Journal: US20160159905A1
Application: Flow Cytometry
Product: PD1-H82E5
6. Anti-pd-1 antibodies and methods of use thereof
Authors: Yasmina Noubia Abdiche, et al.
Journal: US20160159905A1
Application: Flow Cytometry
Product: PD2-H82E8
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