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Your Position: ホーム > 高生物活性の三量体タンパク質(MALSにより検証

高生物活性の三量体タンパク質(MALSにより検証済み)

TNFSF proteins: MALS verified authentic trimer
バックグラウンド

免疫前処理、抗体のスクリーニングと同定、候補抗体薬のin vitro機能検証、抗体医薬品の品質管理、開発、臨床サンプル分析などのプロセスを進めるためには、正確なフォールディングとコンフォメーションを備えた組換えタンパク質が必要です。正確なポリシストロン構造を持っているタンパク質は生理的機能を発揮し、下流の経路を効果的に活性化します。 例えば、免疫反応の制御に重要な役割を果たす腫瘍壊死因子(TNF)スーパーファミリーは、自然状態では三量体構造で、三量体であるTNF-αがTNFR1の細胞外ドメインに結合することで、TNFR1の三量体化が起こり、下流経路を刺激してアポトーシスを引き起こします。タンパク質の凝集状態は、タンパク質の機能や活性を決定する重要な特性の一つであるため、組換えタンパク質の設計、発現、生産は厳密であるべきです。また、タンパク質の凝集状態を特徴付けるには正確で信頼性の高い分子量分析法を確立することが必要だとされています。

通常のタンパク質分子量測定技術は、相対定量法(SEC-HPLC、高速モレキュラーシーブ液体クロマトグラフィー)と絶対定量法(SEC-MALS、マルチアングルレーザー光散乱)とされています。この二つの技術により、溶液中のタンパク質の分子量を測定できます。しかし、原理が異なるため、検出結果の精度に大きな違いが生じます(表1)。SEC-HPLCでは、標準タンパク質を使用して分子量を測定しますが、実際の試験では多くの要因によって妨害され、タンパク質の実際の分子量と凝集状態を正確に取得することは困難だとされています。MALSでは、タンパク質の分子量と光散乱の強度との相関関係に基づいて、標準タンパク質を使用せずにタンパク質の絶対分子量を測定し、溶出量にも依存しません。SECによって分離された成分はマルチアングル光散乱検出器に入り、レーザーが分析物に照射されると、光散乱が発生します。MALSでは複数の角度で散乱光の強度を同時に測定します(図1.a)。式b1は次のようになります。散乱光の強度は、モル質量、濃度、屈折率の増分の2乗に比例し、分析物の絶対分子量は、式b2を使用して直接計算できます。

市場の需要を満たすために、弊社ACROBiosystemsはHEK293によって発現し、MALS検証済みのTNFスーパーファミリー分子タンパク質を25種類開発しております。提供しておるTNFシリーズタンパク質は、免疫、SPR、高分子抗体薬の細胞活性検出などの実験に適しています。さらに、AvitagTMビオチン化タンパク質も提供しており、薬剤開発をサポートします。

特長

タンパク質の分子量と凝集状態はSEC-MALSによって検証されています

OXL-H52Q8
Human OX40 Ligand /TNFSF4 Protein, His Tag, active trimer

Fig.1 The purity of Human OX40 Ligand, His Tag, active trimer (Cat. No. OXL-H52Q8) is more than 95% and around 60-80 kDa verified by SEC-MALS.

CDL-H5266
Human CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.2 The purity of Human CD27 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified, Cat. No. CDL-H5266) is more than 85% and around 160-190 kDa verified by SEC-MALS

タンパク質の生物活性は、細胞実験、SPR、ELISAによって検証されています

CDL-H5269
Human CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.3 FACS analysis shows that Human CD40 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. CDL-H5269) can bind to 293T-CD40 cells surface CD40. The concentration of Human CD40 Ligand is 0.3 μg/mL.

TNA-H4211
ActiveMax® Human TNF-alpha Protein, Tag Free, active trimer

Fig.4 ActiveMax® Human TNF-alpha, Tag Free, low endotoxin (active trimer) (MALS verified) (Cat. No. TNA-H4211) induces cytotoxicity effect on the WEH1-13VAR cells in the presence of the metabolic inhibitor actinomycin D. The EC50 for this effect is 0.007-0.014 ng/mL.

41L-H52D4
Human 4-1BB Ligand / TNFSF9 Protein, His,Flag Tag, active trimer

Fig.5 Human 4-1BB Ligand (71-254), His,Flag Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. 41L-H52D4) induce IL-8 secretion in HT1080 human CD137 cell line. The EC50 for this effect is 0.20-0.44 μg/mL.

LIT-H5242
Human LIGHT /TNFSF14 Protein, His Tag, active trimer

Fig.6 Human LIGHT, His Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. LIT-H5242) induced cytotoxicity in HT-29 cells. The ED50 for this effect is 1.11-3.87 ng/mL.

RAL-H5240
Human TNFSF11 /RANKL /CD254 Protein, His Tag, active trimer

Fig.7 Captured Human RANK, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin (Cat. No. RAK-H5251)  on CM5 chip via Anti-Mouse antibodies surface can bind Human TNFSF11, His Tag, active trimer (Cat. No. RAL-H5240) with an affinity constant of 0.309 nM as determined in a SPR assay (Biacore T200).

CDL-H5266
Human CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.8 Immobilized Human CD27, His Tag (Cat. No. CD7-H522b) at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Human CD27 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. CDL-H5266) with a linear range of 0.2-8 ng/mL.

製品一覧
分子名製品番号生物種説明
4-1BB Ligand41L-H5265HumanHuman 4-1BB Ligand / TNFSF9 (71-254) Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
41L-H52D4HumanHuman 4-1BB Ligand / TNFSF9 (71-254) Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
APRILAPL-H52D1HumanHuman APRIL / TNFSF13 Protein, His,Flag Tag, active trimer (MALS verified)Hot
BAFFBAF-H5261HumanHuman BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, Fc Tag, active trimer (MALS verified)
BAF-H52D4HumanHuman BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, His,Flag Tag, active trimer (MALS verified)
BAF-H82F3HumanBiotinylated Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, Avitag™,Fc Tag (active trimer) (MALS verified)
BAF-H82Q2HumanBiotinylated Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
CD27 LigandCDL-H5266HumanHuman CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
CDL-H52DaHumanHuman CD27 Ligand / CD70 Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-H82D7HumanBiotinylated Human CD27 Ligand / CD70 Protein, His,Avitag™,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-C5244CynomolgusCynomolgus CD27 Ligand / CD70 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-M5245MouseMouse CD27 Ligand / CD70 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
CD40 LigandCDL-H5269HumanHuman CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
CDL-H52DbHumanHuman CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-M5248MouseMouse CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
Fas LigandFAL-H5241HumanHuman Fas Ligand / TNFSF6 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
LIGHTLIT-H5242HumanHuman LIGHT / TNFSF14 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
LIT-H5269HumanHuman LIGHT / TNFSF14 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
OX40 LigandOXL-H52Q8HumanHuman OX40 Ligand / TNFSF4 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
TNF-alphaTNA-H4211HumanActiveMax® Human TNF-alpha Protein, Tag Free, low endotoxin (active trimer) (MALS verified)
TNA-H5228HumanHuman TNF-alpha Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
TNA-H8211HumanBiotinylated Human TNF-alpha Protein, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) (active trimer) (MALS verified)
TNA-H82E3HumanBiotinylated Human TNF-alpha Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
TNA-M82E9MouseBiotinylated Mouse TNF-alpha Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
TNFSF11RAL-H5240HumanHuman TNFSF11 / RANKL / CD254 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
RAL-H82Q5HumanBiotinylated Human TNFSF11 / RANKL / CD254 Protein, His,Avitag™, active trimer (MALS verified)

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