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高生物活性の三量体タンパク質（MALSにより検証済み）

TNFSF proteins: MALS verified authentic trimer
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免疫前処理、抗体のスクリーニングと同定、候補抗体薬のin vitro機能検証、抗体医薬品の品質管理、開発、臨床サンプル分析などのプロセスを進めるためには、正確なフォールディングとコンフォメーションを備えた組換えタンパク質が必要です。正確なポリシストロン構造を持っているタンパク質は生理的機能を発揮し、下流の経路を効果的に活性化します。 例えば、免疫反応の制御に重要な役割を果たす腫瘍壊死因子（TNF）スーパーファミリーは、自然状態では三量体構造で、三量体であるTNF-αがTNFR1の細胞外ドメインに結合することで、TNFR1の三量体化が起こり、下流経路を刺激してアポトーシスを引き起こします。タンパク質の凝集状態は、タンパク質の機能や活性を決定する重要な特性の一つであるため、組換えタンパク質の設計、発現、生産は厳密であるべきです。また、タンパク質の凝集状態を特徴付けるには正確で信頼性の高い分子量分析法を確立することが必要だとされています。

通常のタンパク質分子量測定技術は、相対定量法（SEC-HPLC、高速モレキュラーシーブ液体クロマトグラフィー）と絶対定量法（SEC-MALS、マルチアングルレーザー光散乱）とされています。この二つの技術により、溶液中のタンパク質の分子量を測定できます。しかし、原理が異なるため、検出結果の精度に大きな違いが生じます（表1）。SEC-HPLCでは、標準タンパク質を使用して分子量を測定しますが、実際の試験では多くの要因によって妨害され、タンパク質の実際の分子量と凝集状態を正確に取得することは困難だとされています。MALSでは、タンパク質の分子量と光散乱の強度との相関関係に基づいて、標準タンパク質を使用せずにタンパク質の絶対分子量を測定し、溶出量にも依存しません。SECによって分離された成分はマルチアングル光散乱検出器に入り、レーザーが分析物に照射されると、光散乱が発生します。MALSでは複数の角度で散乱光の強度を同時に測定します（図1.a）。式b1は次のようになります。散乱光の強度は、モル質量、濃度、屈折率の増分の2乗に比例し、分析物の絶対分子量は、式b2を使用して直接計算できます。

市場の需要を満たすために、弊社ACROBiosystemsはHEK293によって発現し、MALS検証済みのTNFスーパーファミリー分子タンパク質を25種類開発しております。提供しておるTNFシリーズタンパク質は、免疫、SPR、高分子抗体薬の細胞活性検出などの実験に適しています。さらに、AvitagTMビオチン化タンパク質も提供しており、薬剤開発をサポートします。

特長

タンパク質の分子量と凝集状態はSEC-MALSによって検証されています

OXL-H52Q8
Human OX40 Ligand /TNFSF4 Protein, His Tag, active trimer

Fig.1 The purity of Human OX40 Ligand, His Tag, active trimer (Cat. No. OXL-H52Q8) is more than 95% and around 60-80 kDa verified by SEC-MALS.

CDL-H5266
Human CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.2 The purity of Human CD27 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified, Cat. No. CDL-H5266) is more than 85% and around 160-190 kDa verified by SEC-MALS

タンパク質の生物活性は、細胞実験、SPR、ELISAによって検証されています

CDL-H5269
Human CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.3 FACS analysis shows that Human CD40 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. CDL-H5269) can bind to 293T-CD40 cells surface CD40. The concentration of Human CD40 Ligand is 0.3 μg/mL.

TNA-H4211
ActiveMax® Human TNF-alpha Protein, Tag Free, active trimer

Fig.4 ActiveMax® Human TNF-alpha, Tag Free, low endotoxin (active trimer) (MALS verified) (Cat. No. TNA-H4211) induces cytotoxicity effect on the WEH1-13VAR cells in the presence of the metabolic inhibitor actinomycin D. The EC50 for this effect is 0.007-0.014 ng/mL.

41L-H52D4
Human 4-1BB Ligand / TNFSF9 Protein, His,Flag Tag, active trimer

Fig.5 Human 4-1BB Ligand (71-254), His,Flag Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. 41L-H52D4) induce IL-8 secretion in HT1080 human CD137 cell line. The EC50 for this effect is 0.20-0.44 μg/mL.

LIT-H5242
Human LIGHT /TNFSF14 Protein, His Tag, active trimer

Fig.6 Human LIGHT, His Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. LIT-H5242) induced cytotoxicity in HT-29 cells. The ED50 for this effect is 1.11-3.87 ng/mL.

RAL-H5240
Human TNFSF11 /RANKL /CD254 Protein, His Tag, active trimer

Fig.7 Captured Human RANK, Mouse IgG2a Fc Tag, low endotoxin (Cat. No. RAK-H5251) on CM5 chip via Anti-Mouse antibodies surface can bind Human TNFSF11, His Tag, active trimer (Cat. No. RAL-H5240) with an affinity constant of 0.309 nM as determined in a SPR assay (Biacore T200).

CDL-H5266
Human CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag, active trimer

Fig.8 Immobilized Human CD27, His Tag (Cat. No. CD7-H522b) at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Human CD27 Ligand, Fc Tag, active trimer (MALS verified) (Cat. No. CDL-H5266) with a linear range of 0.2-8 ng/mL.

製品一覧
分子名 製品番号 生物種 説明
4-1BB Ligand 41L-H52D4 Human Human 4-1BB Ligand / TNFSF9 (71-254) Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
APRIL APL-H52D1 Human Human APRIL / TNFSF13 Protein, His,Flag Tag, active trimer (MALS verified)Hot
BAFF BAF-H5261 Human Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, Fc Tag, active trimer (MALS verified)
BAF-H52D4 Human Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, His,Flag Tag, active trimer (MALS verified)
BAF-H82F3 Human Biotinylated Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, Avitag™,Fc Tag (active trimer) (MALS verified)
BAF-H82Q2 Human Biotinylated Human BAFF / TNFSF13B / CD257 Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
CD27 Ligand CDL-H5266 Human Human CD27 Ligand / CD70 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
CDL-H52Da Human Human CD27 Ligand / CD70 Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-H82D7 Human Biotinylated Human CD27 Ligand / CD70 Protein, His,Avitag™,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-M5245 Mouse Mouse CD27 Ligand / CD70 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
CD40 Ligand CDL-H5269 Human Human CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
CDL-H52Db Human Human CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, His,Flag Tag (active trimer) (MALS verified)
CDL-M5248 Mouse Mouse CD40 Ligand / TNFSF5 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
Fas Ligand FAL-H5241 Human Human Fas Ligand / TNFSF6 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
LIGHT LIT-H5242 Human Human LIGHT / TNFSF14 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
LIT-H5269 Human Human LIGHT / TNFSF14 Protein, Fc Tag (active trimer) (MALS verified)Hot
OX40 Ligand OXL-H52Q8 Human Human OX40 Ligand / TNFSF4 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
TNF-alpha TNA-H4211 Human ActiveMax® Human TNF-alpha Protein, Tag Free, low endotoxin (active trimer) (MALS verified)
TNA-H5228 Human Human TNF-alpha Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
TNA-H8211 Human Biotinylated Human TNF-alpha Protein, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) (active trimer) (MALS verified)
TNA-H82E3 Human Biotinylated Human TNF-alpha Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
TNA-M82E9 Mouse Biotinylated Mouse TNF-alpha Protein, His,Avitag™ (active trimer) (MALS verified)
TNFSF11 RAL-H5240 Human Human TNFSF11 / RANKL / CD254 Protein, His Tag (active trimer) (MALS verified)
RAL-H82Q5 Human Biotinylated Human TNFSF11 / RANKL / CD254 Protein, His,Avitag™, active trimer (MALS verified)
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